Cách bảo quản mẫu vi khuẩn dài hạn


Materials and Equipment

  • Bút ghi nhãn
  • Dịch vi khuẩn mới nuôi cấy (lỏng), nuôi qua đêm, khoảng từ 8-12 tiếng là tốt nhất cho bảo quản đông lạnh
  • Pipet 1 mL ; đầu típ đã thanh trùng
  • Tube ly tâm hoặc tube có nắp đậy
  • Glycerol đã thanh trùng
  • Nito lỏng (có thể có hoặc không)
  • Liquid nitrogen (optional)
  • Túi ni lông có thể khóa kín (Túi có đường viền gắn lại được dùng để để tube chứa vi khuẩn vào bên trong tránh không khí)
  • Tủ lạnh

Procedure

  1. Ghi nhãn vi khuẩn, ngày tháng
  2. Thêm 150 uL glycerol vào tube (pha loãng glycerol để đạt nồng độ cuối từ 5-15%, thông thường dùng 10% Glycerol bằng cách pha loãng 2 lần glycerol 20% trong dịch nuôi vi khuẩn)
  3. Dùng tip mới thêm 850 uL dịch nuôi tb vi khuẩn vào ống đó
  4. Đậy nắp và dốc xuôi ngược tube để trộn đều glycerol và vi khuẩn
  5. Nếu định bảo quản ở -80 độ thì trước hết phải SNAP-FREE vi khuẩn bằng cách cho vào nito lỏng. Nếu chỉ định bảo quản ở tủ lạnh (-20 độ) thì không cần xử lý gì thêm
  6. Chú ý: Không nên bảo quản mẫu vi khuẩn trong cùng tủ lạnh với thức ăn, nếu buộc phải vậy thì ta cho vào 2 lần túi bóng kín (resealable bags) để tránh nhiễm chéo

Credits given to Parafilm®

OSAMAHIEP

Advertisements

5 responses to “Cách bảo quản mẫu vi khuẩn dài hạn

  1. Dear,
    Tôi tên là Sử Quốc Khởi đang công tác tại bvdk Kiên Giang. Chuyện là tôi có người Cha bị nhiễm Helicobacter pylori và đã điều trị nhiều năm nhưng không hết. Tôi đã liên hệ viện nghiên cứu Marshall (úc) giúp đỡ. Tại đây đã d8ưa cha tôi vào lô nghiên cứu và cần gửi mẫu sang đó. gửi mẫu cần có môi trường BHI và glycerol. Tôi tìm mua glycerol nhưng không có và tôi thấy bài viết của bạn rất gần gủi với cách mà ngươi Úc đã chỉ dẫn. Tôi xin hỏi mình mua glycerol ở đâu zậy bạn, nó có tên gì khác nưa không? giá thành có đắt không. nếu được bạn cho mình số đt để tiện liên lạc. Cám ơn bạn nhiều. Mong tin

    Like

    • Chào anh Khởi,
      Glycerol còn có tên khác là Glycerin (C3H8O3), có bán rất nhiều ở Việt Nam.Glycerol chỉ là một dung môi thông thường hay dùng chứ không cần có yêu cầu gì đặc biệt trong trường hợp bảo quãn mẫu này (Anh nên chú ý khi mua, nên mua Glycerol/Glycerin có độ tinh sách cao, thông thường họ đều bán ở độ tinh sạch 98%). Qua tìm kiếm thì cũng có nhiều công ty cung cấp. Ngoài ra nếu muốn anh cũng có thể đặt Glycerol của Sigma – Aldrich (Thời gian ship về cũng có thể mất tới ít nhất 1 tuần , tùy theo hàng còn hay hết).

      Một số link cho anh tham khảo:

      Link order: (Anh cuộn xuống dưới cùng sẽ có chi nhánh ở Việt Nam)
      http://www.sigmaaldrich.com/singapore/ordering.html)
      Link sản phẩm Glycerol:

      1) Sigma: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/g5516?lang=ko&region=KR

      2) Khác: http://sieuthidungmoi.com.vn/San-pham/Glycerin.aspx (Đây là một kết quả tìm kiếm từ google, không nhất thiết phải là công ty này)
      ………

      3) Ngoài ra nếu anh lên google tìm cũng ra rất nhiều công ty cung cấp.

      Like

  2. cho em hỏi nếu giờ em có glycerol 40% thì pha ra 20% rồi mới sử dụng hay là em để nguyên rồi hút 500microlit dịch vi sinh vật cộng với 500 microlit glycerol 40% à? em cảm ơn nhiều

    Like

Leave a Reply

Fill in your details below or click an icon to log in:

WordPress.com Logo

You are commenting using your WordPress.com account. Log Out / Change )

Twitter picture

You are commenting using your Twitter account. Log Out / Change )

Facebook photo

You are commenting using your Facebook account. Log Out / Change )

Google+ photo

You are commenting using your Google+ account. Log Out / Change )

Connecting to %s