Monoclonal & Polyclonal antibody


Kháng thể đơn dòng và đa dòng, cách sử dụng chúng trong sandwich assay

Liên quan tới 2 loại kháng thể này, cả 2 đều có thể sử dụng thay thế nhau như là capture antibody hoặc detection antibody trong hệ thống ELISA.

Kháng thể đơn dòng có tính đặc hiệu riêng biệt với 1 epitope đặc hiệu cho phép sự phát hiện tốt và định lượng sự khác biệt nhở của antigen.

1 kháng thể đa dòng hay được dùng như là capture antibody để kéo xuống nhiều nhất lượng antigen có thể, khi đó kháng thể đơn dòng được sử dụng như là 1 detection antibody trong xét nghiệm kiểu bánh kẹp sandwich nhằm có tính đặc hiệu tốt hơn.

Tuy nhiên: 

Hi I have the opposite advice, I work at a biotech company and all our ELISA matched antibody pairs work on the principal that capture antibody is monoclonal while the detection is polyclonal, this is because you want specificity during the binding of your analyte (thus a monoclonal) then once the plate is washed your a left with only the analyte of interest, the detection is usually a polyclonal as this various configurations during the initial capture and the blocking proteins mean that having a polyclonal maximise your ability to detect the bound analyte.

In the above way if you use a polyclonal first you run the risk of getting an increase in non-specific binding with is not washed away and can give you false positives

 Và

i agree with the concept given where u use the monoclones as the capture abs… even so the use of polyclonals may not be totally not suitable for use. It largely depends on the sensitivity and type of antigen you want to capture. Of course the polyclonal being poly-specific may tend to capture other structurally similar molecules that may have some small resemblance to your antigen of interest which would lead to flase positive results. If it is possible use two monoclonal antibodies with different epitopes for ur assay. Would help increase ur specificity.
blink.gif

 

-MicroKiller-
Advertisements

Leave a Reply

Fill in your details below or click an icon to log in:

WordPress.com Logo

You are commenting using your WordPress.com account. Log Out / Change )

Twitter picture

You are commenting using your Twitter account. Log Out / Change )

Facebook photo

You are commenting using your Facebook account. Log Out / Change )

Google+ photo

You are commenting using your Google+ account. Log Out / Change )

Connecting to %s